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Modulação da degradação enzimática de galactomanano por su ...
Encarnação, Thalita Beatriz Carrara da
Modulação da degradação enzimática de galactomanano por sua própria estrutura fina
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Autor: Encarnação, Thalita Beatriz Carrara da
Acervo: (us) Universidade de São Paulo
Categoria: Mestrado
Resumo: Sementes de Sesbania virgata (Cav.) Pers. acumulam suas reservas de carbono no endosperma na forma de um polissacarídeo de parede celular, o galactomanano. Os galactomananos são polissacarídeos constituídos de uma cadeia principal de resíduos de D-manose ligadas &beta.-1,4, ramificada por resíduos de D-galactose &alpha.-1,6 ligados. A mobilização deste ocorre após a germinação e envolve três enzimas hidrolíticas (&alpha.-galactosidase, endo-&beta.-mananase e exo-&beta.-manosidase). A &alpha.-galactosidase é a primeira enzima atuar sobre o galactomanano hidrolisando as ligações &alpha.-1,6 das galactoses ramificadas a cadeia principal de manano (ligados &beta.-1,4), permitindo a ação da endo-&beta.-mananase, que hidrolisará o polissacarídeo a oligossacarídeos, onde a &beta.-manosidase atuará (ligações &beta.-1,4), transformando oligossacarídeos a monossacarídeos a serem utilizados no desenvolvimento do embrião. Buscando a compreensão das características da &alpha.-galactosidase e modo de ação sobre o galactomanano, procedeu-se com a purificação, em três etapas,e caracterização bioquímica (pH ótimo, temperatura ótima e aspectos cinéticos) da &alpha.-galactosidase de sementes de Sesbania virgata (Cav.) Pers. Além disso, visando evidenciar a modulação da enzima endo-&beta.-mananase pela distribuição de ramificações de galactose no galactomanano (estrutura fina do galactomanano), procedeu-se com hidrólises enzimáticas do galactomanano de Sesbania virgata (Cav.) Pers. utilizando a enzima endo-&beta.-mananase de Aspergillus niger (Megazyme®.) somente ou em conjunto com a &alpha.-galactosidase semipurificada de Sesbania virgata (Cav.) Pers. (Capítulo 1) ou com a &alpha.-galactosidase comercial de Cyamopsis tetragonoloba (Megazyme®.), seguido de análise dos oligossacarídeos por HPAEC-PAD (High Performance Anion Exchange Chromatography with Pulsed Amperometric Detection). Também procedeu-se com hidrólises enzimáticas de galactomananos de 6 espécies com razão man
